無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)
無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn):
1.可避免血清批次間的質(zhì)量變動(dòng),提高細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。
2.避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。
3.避免血清組分對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的影響。
4.有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。
5.可提高產(chǎn)品的表達(dá)水平并使細(xì)胞產(chǎn)品易于純化。
6.組分穩(wěn)定,可大量生產(chǎn)。
7.不含有絲分裂原抑制劑,可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。
無(wú)血清培養(yǎng)基的缺點(diǎn):
1.細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中易受某些機(jī)械因素和化學(xué)因素的影響,培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不 如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。
2.成本較高。
3.針對(duì)性很強(qiáng),一種無(wú)血清培養(yǎng)基僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。
4.處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方,對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí),也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用,因此對(duì)試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。
目前,無(wú)血清培養(yǎng)基的研究有兩個(gè)方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動(dòng)物來(lái)源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無(wú)血清培養(yǎng)基歸納為以下四種:
1.一般意義上的無(wú)血清培養(yǎng)基,用各類可代替血清功能的生物材料配制細(xì)胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA),轉(zhuǎn)鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類以及水解蛋白等。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動(dòng)物來(lái)源蛋白。
2.無(wú)動(dòng)物來(lái)源培養(yǎng)基:許多商業(yè)公司開(kāi)發(fā)的無(wú)動(dòng)物來(lái)源培養(yǎng)基是基于生產(chǎn)重組藥物的安全考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無(wú)動(dòng)物來(lái)源,需要的蛋白來(lái)源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖的需要。
3.無(wú)動(dòng)物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基*不用動(dòng)物來(lái)源的蛋白,但仍有部分添加物是來(lái)源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養(yǎng)基組分相對(duì)穩(wěn)定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞是高度特異性的。
4.化學(xué)組分限定培養(yǎng)基,此類無(wú)血清培養(yǎng)基是目前zui安全的,zui為理想的培養(yǎng)基,首先可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性,其中所添加的少量動(dòng)物來(lái)源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基的性質(zhì)確定,配起培養(yǎng)基來(lái)也比較方便。